聚合酶链反应(PCR)是在体外复制DNA进行大规模DNA扩增的技术,是分子生物学最基本、最重要、最常用的技术之一。其基本原理就是将作为模板的DNA片段进行不断的热循环反应,来扩增目标DNA片段,该技术使得DNA扩增量高达数百万甚至数千万倍。
PCR主要由以下三个步骤组成:样品处理和DNA分离,反应液调配及PCR循环。PCR循环中有三个步骤循环进行:变性(Denaturation)、退火(Annealing)及延伸(Extension)。变性过程将DNA双链解开为单链;退火时引入两个引物,引物会两端连接DNA链;延伸时DNA聚合酶按照引物所在的位置从5’向3’方向进行合成。一次循环后,进行了特定时间加热使得DNA链的两端再次分离,准备下一轮循环扩增。